环亚集团·AG88推出的猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）为您提供了高效的检测解决方案，确保猪群的健康与安全。

产品信息

产品名称：猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名：Test Kit for Antibodies to Classical Swine Fever Virus (ELISA)

包装规格：96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

用途与背景

猪瘟是一种由猪瘟病毒（Classical Swine Fever Virus, CSFV）引起的高度接触性、出血性和致死性传染病，此病特征包括高热、微血管壁变性导致的广泛出血和坏死等症状。该试剂盒专为检测猪血清中猪瘟病毒抗体而设计，能够有效评价猪瘟病毒疫苗的免疫效果。

原理

本试剂盒包含预包被猪瘟病毒重组E2蛋白的酶标板和酶标记物等配套试剂，采用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清和血浆样本中的猪瘟病毒抗体。实验中，样品通过反应结合在酶标板上的抗原，与酶标记物的特异性结合形成复合物，随后通过显色反应定量分析样品中的抗体含量。

储存与有效期

试剂在2～8℃下保存，有效期为12个月。打开后的包被板需于2～8℃避光保存，使用期限为2个月。

适用仪器

需配备能在450nm和630nm波长下工作的酶标仪、37℃恒温设备及可调微量移液器。

样品准备

1. 根据常规方法从动物全血中提取清亮的血清，无溶血和污染。样品可在2～8℃下保存1周，长期保存需置于-20℃。
2. 使用样品稀释液将待检血清按40倍稀释（例：5μl血清与195μl稀释液混合）。阴性和阳性对照无需稀释。
3. 浓缩洗涤液应恢复至室温再用蒸馏水或去离子水按20倍稀释为工作洗涤液。

检验步骤

1. 试剂盒使用前置于室温30分钟，以便恢复温度。
2. 取所需酶标板，并设置阴性和阳性对照，每种各2孔，未用板条请密封保存于2～8℃。
3. 在阴、阳性对照孔各加入100μl相应的对照液，样品孔加入稀释后的样品100μl。
4. 混匀后盖好盖板膜，置于37℃（推荐水浴）避光反应30分钟。
5. 清洗操作，加入工作洗涤液350μl，静置30秒后弃去，并重复洗涤5次，最后拍拍干。
6. 每孔加入酶标记物100μl，盖膜，置于37℃避光反应30分钟。
7. 再次进行清洗，遵循前面清洗步骤。
8. 每孔依次加入底物液A和B各50μl，混匀后在37℃避光反应10分钟。
9. 添加终止液50μl，混匀后于450nm（可用630nm作为参比波长）测定各孔的吸光值。

结果判定与参考值

在实验正常情况下，阴性对照的平均OD值（ODNC）应≤0.3，阳性对照的平均OD值（ODPC）应≥0.6。样品的OD值（ODS）用于阈值计算：SP值=(ODS-ODNC)/(ODPC-ODNC)。如SP值≥0.2，则结果判定为阳性；如SP值<0.2，结果判定为阴性。阴性结果表示猪只抗体水平不足，建议及时补打相应疫苗。

注意事项

• 在实验操作时需佩戴手套和工作衣，严格遵守消毒隔离制度，所有实验废弃物按传染物处理。
• 终止液具有腐蚀性，避免皮肤和衣物接触，意外接触需立即用大量自来水冲洗。
• 酶标板从冷藏环境取出后需恢复至室温，未用完的板条需放入密封袋中与干燥剂一起保存。
• 浓缩洗涤液在低温时易结晶，使用前恢复至室温以确保完全溶解。
• 样品应保持新鲜，且试验结果判定需依赖酶标仪读数。
• 不同批号的试剂组分不得混用。

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