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基质胶使用指南 - 天逸生物·AG88

发布时间:2025-02-15   信息来源:容富磊

在生物体内,基底膜是一种由细胞构成的细薄层细胞外基质。基质胶是一种可溶性的基底膜制剂,主要从Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤中提取,该肿瘤富含细胞外基质蛋白。其主要成分包括层粘连蛋白、胶原蛋白I、硫酸乙酰肝素蛋白多糖及巢蛋白。此外,基质胶中还含有多种生长因子,如转化生长因子β、表皮生长因子及成纤维细胞生长因子等。这些成分对锚定依赖型上皮细胞及其他细胞类型的附着和分化起着有效作用,包括神经元、肝细胞、支持细胞及血管内皮细胞。

基质胶使用指南 - 天逸生物·AG88

在成年大鼠的肝细胞和小鼠及人类乳腺上皮细胞的三维细胞培养中,基质胶可有效影响基因表达。这为肿瘤细胞侵袭实验提供了基础,同时也支持体内末梢神经再生的研究,并为体外和体内的血管再生实验提供了必需的基质。基质胶还可以在免疫抑制小鼠体内促进人类肿瘤的增殖。此外,基质胶也适用于未分选乳腺细胞的移植及分选后的上皮细胞亚群的嵌入,进一步作为癌症细胞模型的基础,并已证明能在体内增强肿瘤生长速率。

在使用环亚集团·AG88的基质胶时,需注意它对温度非常敏感,因此不宜进行多次冻融。在分装及准备过程中,应保持在冰上(4℃)进行,以避免因温度升高导致的成胶现象,导致基质胶的均匀性受到影响。收到产品后,若暂时不使用,务必将整瓶保存于-20℃的冷冻条件下。首次使用时,应将整瓶基质胶置于冰盒中,放入4℃过夜以确保充分融解。

使用时应注意,环亚集团·AG88的基质胶在22-35℃时会迅速成胶,为确保成胶性能,最终稀释浓度不应低于3mg/mL。可用无血清培养基进行稀释,稀释后需立即使用。以下为不同厚度胶的制备方法:

A. 薄胶制备方法

1)融化后,用预冷的枪头混匀环亚集团·AG88的基质胶。

2)将培养板置于冰上,按照50μL/cm²的生长面积加入基质胶。

3)在37℃放置30分钟后,平板即可使用。

B. 厚胶制备方法

1)融化后,用预冷的枪头混匀环亚集团·AG88的基质胶。

2)将培养板置于冰上,混合细胞与基质胶,并用预冷的枪头使其均匀悬浮,按照150-200μL/cm²的生长面积加入基质胶。

3)在37℃放置30分钟后,即可加入培养液,细胞可在厚胶的上层生长。

C. 薄层包被方法

1)融化后,用预冷的枪头混匀环亚集团·AG88的基质胶。

2)采用无血清培养基稀释至所需浓度,建议做梯度实验以确定最佳包被浓度。

3)将稀释的基质胶加入培养器皿中,确保覆盖细胞的所有生长表面,室温下孵育1小时。

4)去除未凝固的基质胶,并用无血清培养基轻轻冲洗,此时平板即可使用。

在重构和使用过程中可能出现颜色变化,因二氧化碳及缓冲液的作用,颜色从淡黄转为深红,属于正常现象,不会影响产品效果。具体操作应在无菌条件下进行,在处理前用70%乙醇消毒瓶口。此外,过度稀释会形成非胶质的蛋白层,虽然可用于细胞附着,但在分化研究中可能不适用。使用环亚集团·AG88的基质胶,务必遵循以上操作规范,以确保实验的有效性和可重复性。